Micobactérias
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PESQUISA DE BAAR (BACILO ÁLCOOL-ÁCIDO RESISTENTE), ZIEHL-NEELSEN
As micobactérias são bacilos álcool-ácido resistentes, os quais são circundados por uma parede celular hidrofóbica, e que resistem à descoloração causada pelas misturas de álcool-ácido usadas na identificação. A pesquisa é usada no diagnóstico das infecções causadas por micobactérias (tuberculose, hanseníase e outras formas de infecções), além de auxiliar na monitoração de pacientes em tratamento com antimicobacterianos.
Método
Ziehl-Neelsen.
Pesquisa de tuberculose:
– Secreções pulmonares: escarro, expectorado ou induzido, e lavado broncoalveolar.
– Líquidos corporais: líquor e líquidos pleural, ascítico, peritoneal, sinovial, pericárdico ou amniótico.
– Urina: 1ª urina matinal. Desprezar o 1º jato urinário (primeiros 10 a 15 mL) e colher todo o restante da micção. Obs.: as amostras de 24 horas colhidas em “pool” são inadequadas.
– Aspirado de secreções de feridas.
– Obs.: swabs devem ser evitados. Se não for possível a obtenção de aspirados ou biópsias, o swab pode ser utilizado e colocado em meio de transporte de Stuart.
– Lavado gástrico: jejum desejável de 8 horas.
– Outros: material de punção de linfonodos, abscessos, biópsias, sangue, medula óssea, fezes, sangue menstrual, esperma, etc.
Pesquisa de hanseníase:
– Raspado da incisão de lóbulo de orelha, dobra de cotovelo e lesões ativas de pele ou áreas dormentes. A mucosa nasal é o local menos sensível e específico, não sendo recomendado.
Urina: estável até 6 horas em temperatura ambiente ou em até 24 horas se refrigerada de 2o a 8o C.
Sangue: estável até 48 horas em temperatura ambiente. Não refrigerar.
Escarro: estável até 48 horas se refrigerado ou até 14 dias em esfregaço fixado e protegido. Outros materiais: até 48 horas entre 2o e 8oC.
Observações:
– O lavado gástrico deverá ser previamente alcalinizado com 3mL de solução de bicarbonato de sódio a 10% fornecida sem ônus pelo laboratório.
– Todas as amostras deverão ser coletadas em frascos estéreis.
– Os esfregaços confeccionados no ato da coleta devem ser fixados pelo calor brando.
PESQUISA DE BAAR (BACILO ÁLCOOL-ÁCIDO RESISTENTE), AURAMINA
Trata-se de um método de pesquisa de BAAR por fluorescência, mais sensível que os métodos tradicionais baseados na carbolfucsina (Ziehl-Neelsen). A auramina (o fluorocromo utilizado) liga-se ao ácido micólico da parede celular da micobactéria, resistindo à descoloracão do álcool-ácido e emitindo fluorescência amarelo-alaranjada sobre o fundo negro.
Método
Fluorescência pela auramina.
Condição
Vide Ziehl-Neelsen: pesquisa de tuberculose.
Obs: este método não é utilizado na rotina para pesquisa de hanseníase.
CULTURA PARA MICOBACTÉRIAS
A cultura para micobactérias é realizada na propedêutica de infecções pulmonares localizadas ou disseminadas para outros locais do corpo como medula óssea, baço, rins e sistema nervoso central. Além do Mycobacterium tuberculosis, outras micobactérias podem levar a infecções granulomatosas ou não, necrotizantes ou não. Dentre elas, destacam-se as micobactérias atípicas em pacientes portadores de SIDA.
Método
Cultura em meio específico.
CULTURA AUTOMATIZADA PARA MICOBACTÉRIAS
A cultura automatizada permite a detecção computadorizada rápida de micobactérias por formação e/ou consumo de gases do metabolismo bacteriano. Apresenta grande utilidade na investigação de pacientes com febre de origem obscura, permitindo, ainda, a identificação de micobactérias atípicas.
Método
Detecção computadorizada rápida de micobactérias.
Condição
Sangue: crianças (coletar 1,0 a 5,0mL); adultos (coletar 5,0mL).
Demais amostras (medula óssea, líquor, líquidos corpóreos, escarro, lavado broncoalveolar, etc): coletar no mínimo 1,0mL.
OBS:
– Deve-se, preferencialmente, não estar em uso de antimicrobianos.
– Os frascos dos meios de cultivos são específicos. Os meios devem ser armazenados em temperatura ambiente, protegidos da luz.
Conservação:
Lavado gástrico: deve ser previamente alcalinizado com 100 mg de bicarbonato de sódio. Toda a amostra sujeita a ressecamento deve ser protegida com acréscimo de soro fisiológico.
Sangue e aspirado medular: não refrigerar. Conservar em temperatura ambiente.
Demais amostras: conservar entre 2o e 8o C por até 36 horas. As amostras deverão ser coletadas em frascos estéreis.
TESTE DE SENSIBILIDADE A TUBERCULOSTÁTICOS
São testados antimicrobianos em isolados de culturas. É importante naqueles pacientes com tuberculose submetidos a tratamentos prolongados, como nos casos de falência de esquema primário, retratamento e pacientes com suspeita de resistência.
Método
Cultura em meio específico com drogas:
– Rifampicina, isoniazida, pirazinamida, etambutol, etionamida, estreptomicina e ofloxacina.
Método
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Nível terapêutico ou Valor de Referência
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Condição
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